爲什麼要構建表達載體

因爲方便後續載體攜帶目的基因進入受體細胞。

爲什麼要構建表達載體1

1、得到大量的DNA，雖然PCR也可以，但PCR擴增有出錯率、但你每做一次常規的PCR，而且每次都要重新提DNA和RNA才行，而且，PCR反應的試劑盒又不便宜，用PCR來製備大量DNA有點得不償失。

儘管構建克隆載體也存在操作複雜（相對於PCR），成功率不是極高，而且還要篩選，但一旦你重組成功並轉入了大腸桿菌，你就可以保存了，你想什麼時候用，搖個菌，就可以製備到大量的DNA。

2、測序需要。你想轉表達，你首先得確定你擴增的目的片段是不是你要的，不要以爲你設計了個特異性引物，然後跟你mark的長度就可以確定了，這也只是推測，在科學上不嚴謹。擴增出的基因片段保險起見或者經費允許，要拿去測序，而一般送測的.序列都是構建到載體上的序列，克隆載體上一般也都帶有測序引物，已確定這就是你要的那條序列。你要寫論文必須要給人真憑實據。

爲什麼要構建表達載體2

基因表達載體的構建是基因工程最重要的一個步驟。將目的基因與載體通過DNA連接酶連接形成一個整體，方便後續載體攜帶目的基因進入受體細胞，並將目的基因成功與受體細胞轉導。

目的基因就是能夠產生所需蛋白質的DNA片段，比如抗蟲棉就是植入能產生抗蟲蛋白的`目的基因。

啓動子、終止子：啓動子、終止子是目的基因DNA上特殊排序的鹼基。RNA從啓動子開始轉錄、翻譯，到終止子結束。整個過程完成後便產生所需蛋白質。

標記基因：用於檢測是否已經植入目的基因。植入的成功率其實很低，所以有必要選出已經植入的個體。比如抗蟲棉，判斷是否植入，用種植後讓蟲子吃的方法判斷週期太長。

所以在目的基因前或後植入比如抗四環素基因（如果目的基因成功植入，抗四環素基因也一起植入），然後用四環素來淘汰植入失敗的個體，剩下的都是還有目的基因的個體。除了抗四環素基因，還有熒光基因等，總之就是方便檢測。