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逆轉錄酶作用過程

逆轉錄酶作用過程

逆轉錄酶作用過程,逆轉錄過程由逆轉錄酶催化,此酶也稱依賴RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA爲模板催化DNA鏈的合成。合成的DNA鏈稱爲與RNA互補DNA(complementary DNA, cDNA)。看看逆轉錄酶作用過程。

逆轉錄酶作用過程1

逆轉錄酶的作用是

1、RNA爲模板指導的DNA聚合酶活性;

2、DNA爲模板指導的DNA聚合酶活性;

3、RNaseh活性。

RNA指導的DNA聚合酶活性;以RNA爲模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA爲引物,多爲色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此沒有校正功能,所以由反轉錄酶催化合成的DNA出錯率比較高 。

逆轉錄酶的作用是什麼多選

一般來說不同生物分離出的反轉錄酶具有不同結構,其中大部分是蛋白質或其亞結構如多肽,有一種比較重要的逆轉錄酶爲端粒酶,是個由RNA和蛋白質組成的核糖核酸(RNA)-蛋白複合物,其RNA組分爲模板,蛋白組分具有催化活性,以端粒3'末端爲引物,合成端粒重複序列

逆轉錄酶的主要作用是

rna聚合酶是以一條DNA鏈或RNA爲模板,三磷酸核糖核苷爲底物、通過磷酸二酯鍵而聚合的合成RNA的酶,因爲在細胞內與基因DNA的遺傳信息轉錄爲RNA有關,所以也稱轉錄酶。rna聚合酶作用於磷酸二酯鍵。

rna聚合酶需要四種核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)作爲RNA聚合酶的底物,DNA爲模板,二價金屬離子Mg2+、Mn2+是該酶的必需輔因子。其催化的`反應表示爲:(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi。RNA鏈的合成方向也是5’→3',第一個核苷酸帶有3個磷酸基。其後每加入一個核苷酸脫去一個焦磷酸,形成磷酸二酯鍵,焦磷酸迅速水解的能量驅動聚合反應。與DNA聚合酶不同,RNA聚合酶無須引物,它能直接在模板上合成RNA鏈;RNA聚合酶能夠局部解開DNA的兩條鏈,所以轉錄時無須將DNA雙鏈完全解開,RNA聚合酶無校對功能。

RNA聚合酶催化RNA的合成,其與DNA聚合酶有許多相同的催化特點:①以DNA爲模板;②催化核苷酸通過聚合反應合成核酸;③聚合反應是核苷酸形成3’,5’一磷酸二酯鍵的反應;④以3’→5’方向閱讀模板,5’→3’方向合成核酸;⑤按照鹼基配對原則忠實轉錄模板序列。

逆轉錄酶有什麼用

逆轉錄PCR(Reverse Transcription PCR,RT-PCR)是一種將RNA轉錄成cDNA,再進行PCR擴增的技術。以下是逆轉錄PCR的詳細步驟:

1、RNA提取:從樣品中提取RNA,可以使用商業化RNA提取試劑盒或手工提取方法。

2、逆轉錄反應:將RNA轉錄成cDNA,需要使用逆轉錄酶和引物。逆轉錄酶可以是M-MLV逆轉錄酶或AMV逆轉錄酶等,引物可以是隨機引物或特異性引物。逆轉錄反應的條件包括溫度、時間和反應體系等,需要根據實驗目的和樣品特點進行優化。

3、PCR擴增:將逆轉錄反應產生的cDNA作爲模板,使用特異性引物進行PCR擴增。PCR擴增的條件包括溫度、時間和反應體系等,需要根據引物特點和模板濃度進行優化。

4、PCR產物分析:可以使用凝膠電泳、實時熒光定量PCR等方法對PCR產物進行分析和檢測

需要注意的是,逆轉錄PCR技術需要注意RNA的質量和純度,避免RNA降解和污染對實驗結果的影響。同時,逆轉錄反應和PCR擴增的條件需要進行優化,以獲得高效、特異性和穩定的PCR產物。

逆轉錄酶作用過程
  

逆轉錄酶的作用過程

6大腸埃希菌DNA複製時,①DNA聚合酶Ⅲ②解鏈酶③DNA聚合酶Ⅰ④引物酶⑤DNA連接酶⑥拓撲異構酶,酶催化作用的順序應是 7DNA半保留複製設想的。

逆轉錄酶作用過程2

逆轉錄酶的作用是什麼?

逆轉錄PCR或者稱反轉錄PCR,是聚合酶鏈式反應(PCR)的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉錄成爲互補DNA,再以此爲模板通過PCR進行DNA擴增。

其作用:

1、DNA聚合酶活性,以RNA爲模板,催化脫氧核糖核苷三磷酸聚合成DNA的過程。

2、DNA指導的DNA聚合酶活性,以反轉錄合成的第一條DNA單鏈爲模板,以脫氧核糖核苷三磷酸爲底物,再合成第二條DNA分子

逆轉錄酶作用過程 第2張
  

3、具有酶催化消化信使RNA的能力。

4、逆轉錄酶:又稱爲依賴RNA的DNA聚合酶。

逆轉錄酶作用於氫鍵

解旋酶作用於3-5磷酸二酯鍵不作用於氫鍵,氫鍵是分子間作用力強度較小解旋時便會斷開。

逆轉錄酶的作用是

逆轉錄: 以RNA爲模板,在逆轉錄酶的作用下,以四種遊離脫氧核苷酸爲原料合成DNA的過程。

常見於逆轉錄病毒(某些RNA病毒)的複製中。舉例:艾滋病病毒(HIV)、SARS病毒、禽流感病毒是高中階段會考到的逆轉錄病毒、

逆轉錄酶具有什麼活性

1、DNA聚合酶一般特指以DNA爲指導,消耗dNTP生成DNA的酶。

在原核生物中主要是Ⅰ和Ⅲ等五種,後者承擔主要複製活性,不同亞基有不同功能;前者負責糾錯和修復。

在真核生物中有非常多種DNA聚合酶,其中DNA pol α參與引物鏈的合成;DNA pol β參與SOS修復;DNA pol γ參與線粒體DNA複製,DNA pol δ和DNA pol ε分別參與後隨鏈和前導鏈的複製,DNA pol δ還參與DNA損傷的修復。

2、RNA聚合酶以DNA爲指導,消耗NTP生成hnRNA。

在原核生物中是一個大酶,有六個亞基。其中前五個在一起被叫做核心酶,第六個是σ因子,參與啓動子的識別。

真核生物裏RNA pol Ⅰ參與rRNA的合成;Ⅱ是最重要的,合成mRNA和一些sRNA;Ⅲ合成其他的sRNA。

3、逆轉錄酶有①依賴RNA的DNA聚合活性②核糖核酸酶H活性(用於水解tRNA引物)③依賴DNA的DNA聚合酶活性。也就是說,逆轉錄酶也是一種特殊的DNA聚合酶。

4、RNA複製酶很少提,易錯高突變,很少需要引物。

硬是要說共同點的話、、合成的方向都是3'→5',化學本質都是蛋白質。畢竟第四個連合成場所都不一樣,實在不好找共同點。

什麼叫逆轉錄酶

逆轉錄是以RNA爲模板合成DNA的過程,即RNA指導下的DNA合成。此過程中,核酸合成與轉錄(DNA到RNA)過程與遺傳信息的流動方向(RNA到DNA)相反,故稱爲逆轉錄。

逆轉錄過程是病毒的複製形式之一,如RNA病毒中的逆轉錄病毒,DNA病毒中的擬逆轉錄病毒的複製均需要經過逆轉錄。 逆轉錄過程的揭示是分子生物學研究中的重大發現,是對中心法則的重要修正和補充。

人們通過體外模擬該過程,以樣本中提取的mRNA爲模板,在逆轉錄酶的作用下,合成出互補的cDNA,構建cDNA文庫,並從中篩選特異的目的基因。該方法已成爲基因工程技術中最常用的獲得目的基因的策略之一。

逆轉錄酶的主要作用是

1、ATP合成酶:指催化ADP和磷酸,利用能量形成ATP的酶。

2、 ATP水解酶:指催化ATP水解形成ADP和磷酸,釋放能量的酶。

3、澱粉酶:主要由唾液腺分泌的唾液澱粉酶、胰腺分泌的胰澱粉酶和腸腺分泌的腸澱粉酶,可催化澱粉水解成麥芽糖。

4、麥芽糖酶:主要有胰腺分泌的胰麥芽糖酶和腸腺分泌的腸麥芽糖酶,可催化麥芽糖水解成葡萄糖。

5、蛋白酶:主要有胃腺分泌的胃蛋白酶和胰腺分泌的胰蛋白酶,可催化蛋白質水解成多肽和氨基酸。作用結果是破壞肽鍵和蛋白質的空間結構。

6、肽酶:由腸腺分泌,可催化多肽鏈水解成氨基酸。

7、脂肪酶:主要有胰腺分泌的胰脂肪酶和腸腺分泌的腸脂肪酶,可催化脂肪分解爲脂肪酸和甘油。肝臟分泌的膽汁乳化脂肪形成脂肪微粒後,有利於脂肪分解。

8、轉氨酶:催化蛋白質代謝過程中氨基轉換過程。如人體的谷丙轉氨酶(GPT),能夠把穀氨酸上的氨基轉移給丙酮酸,從而形成丙氨酸和a—酮戊二酸。由於谷丙轉氨酶在肝臟中的含量最多,當肝臟病變時谷丙轉氨酶就大量釋放到血液,因此臨牀上常把化驗人體血液中這種酶的含量作爲診斷是否患肝炎等疾病的一項重要指標。

9、纖維素酶和果膠酶:植物細胞工程中植物體細胞雜交時,需事先用纖維素酶和果膠酶分解植物細胞的細胞壁,從而獲得有活力的原生質體,然後誘導不同植物的原生質體融合。

10、胰蛋白酶:在動物細胞工程的動物細胞培養中,需要用胰蛋白酶將取自動物胚胎或幼齡動物的器官和組織分散成單個的細胞,然後配製成細胞懸浮液進行培養。或用於細胞傳代培養時將細胞從瓶壁上消化下來。

11、 DNA聚合酶:在DNA複製中起作用,是以一條單鏈DNA爲模板,將單個脫氧核苷酸通過磷酸二酯鍵形成一條與模板鏈互補的DNA鏈,形成鏈與母鏈構成一個DNA分子。

12、解旋酶:作用於氫鍵,是一類解開氫鍵的酶,由水解ATP來供給能量它們常常依賴於單鏈的存在,並能識別複製叉的單鏈結構。在細菌中類似的解旋酶很多,都具有ATP酶的活性。大部分的移動方向是5′3′,但也有3′5′移到的情況,如n′蛋白在φχ174以正鏈爲模板合成複製形的過程中,就是按 3′5′移動。在DNA複製中起作用。

13、DNA連接酶:其功能是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。如果將經過同一種內切酶剪切而成的兩段DNA比喻爲斷成兩截的梯子,那麼,DNA連接酶可以把梯子的“扶手”的斷口處(注意:不是連接鹼基對,鹼基對可以依靠氫鍵連接),即兩條DNA黏性末端之間的縫隙“縫合”起來。據此,可在基因工程中用以連接目的基因和運載體。與DNA聚合酶的.不同在於:不在單個脫氧核苷酸與DNA片段之間形成磷酸二酯鍵,而是將DNA雙鏈上的兩個缺口同時連接起來,因此DNA連接酶不需要模板

14、RNA聚合酶:又稱RNA複製酶、RNA合成酶,作用是以完整的雙鏈DNA爲模板,邊解放邊轉錄形成mRNA,轉錄後DNA仍然保持雙鏈結構。對真核生物而言,RNA聚合酶包括三種:RNA聚合酶I轉錄rRNA,RNA聚合酶Ⅱ轉錄mRNA,RNA聚合酶Ⅲ轉錄tRNA和其她小分子RNA。在 RNA複製和轉錄中起作用。

15、逆(反)轉錄酶:爲RNA指導的DNA聚合酶,催化以RNA爲模板、以脫氧核糖核苷酸爲原料合成DNA的過程。具有三種酶活性,即RNA指導的 DNA聚合酶,RNA酶,DNA指導的DNA聚合酶。在分子生物學技術中,作爲重要的工具酶被廣泛用於建立基因文庫、獲得目的基因等工作。在基因工程中起作用。

16、限制性核酸內切酶(簡稱限制酶):限制酶主要存在於微生物(細菌、黴菌等)中。一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,並且能在特定的切點上切割DNA分子,特異性地切斷DNA鏈中磷酸二酯鍵,發現於原核生物體內,現已分離出100多種。例如,從大腸桿菌中發現的一種限制酶只能識別GAATTC序列,並在G和A之間將這段序列切開。目前已經發現了200多種限制酶,它們的切點各不相同。蘇雲金芽孢桿菌中的抗蟲基因,就能被某種限制酶切割下來。

逆轉錄酶作用於哪裏

逆轉錄病毒,該類病毒首先以自身RNA爲模板經逆轉錄酶的催化,形成RNA—DNA雜交分子,再以單鏈DNA爲模板,合成雙鏈DNA,後者整合到宿主細胞的DNA上,進而合成若干子代單鏈RNA。如HIV病毒、Rous肉瘤病毒等。逆轉錄病毒是一類具有包膜的、含ssRNA的球狀病毒,呈二十面體對稱。病毒粒子的組成十分複雜。以小鼠白血癥病毒爲例,除含有一些一般病毒所具有的ssRNA、蛋白質、脂肪和糖類外,還含有逆轉錄酶、核糖核酸酶H、轉化蛋白和DNA連接酶等。  病毒粒子通過其包膜表面的糖蛋白刺穿與宿主細胞膜上的特異受體相識別,經膜的融合或吞噬作用而侵入細胞。

逆轉錄酶作用於磷酸二酯鍵

可以,逆轉錄酶催化的是以RNA爲模板合成DNA的過程,合成DNA就有磷酸二酯鍵形成。

逆轉錄酶作用於什麼鍵

相同點:成份都是蛋白質,都有催化功能異∶作用各不相同DNA聚合酶作用於DNA的磷酸二酯鍵,用於DNA的複製過程形成新鏈用的逆轉錄酶指導RNA上的遺傳信息到DNARNA聚合酶是識別DNA信息模板鏈上的啓動子,催化DNA轉錄形成信使RNARNA複製酶只特異地對病毒RNA起作用,而宿主細胞RNA一般不進行復制。

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標籤: 逆轉錄酶
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